我们已成功建成了居于细菌和哺乳动物细胞两个高速蛋白质人工进化平台。工程细菌和哺乳动物细胞展示抗体和别的蛋白质,结合高速流式多参数分选优化相互作用亲和力和专一性,蛋白表达水平和稳定性。是治疗和高端诊断抗体制备和优化的关键技术平台。
我们的细菌展示系统有以下特点:(1)建大容量展示库简易;(2)与噬菌体展示通用一个表达和展示系统,可以快速富集;(3)可用流式多参数“精确分选”模式富集稀有目标细菌,可获得亲和力、专一性、稳定性同时优化的抗体。
我们的CHO展示系统有如下特点:(1)能自动突变抗体基因,通过CHO细胞繁殖扩增即可获得抗体展示库。(2)待优化抗体可在短时间内嵌入预订染色体位点,在短时间内获得高水平稳定表达展示CHO细胞克隆。(3)CHO细胞增殖周期短,对筛选过程中的损伤抵抗性强,在短时间内可以进行多轮优化分选,快速获得性质优异的目标抗体克隆。(4)在优化亲和力、专一性和稳定性的同时,也优化了在CHO细胞中的表达量。目前CHO细胞是生产治疗性抗体的最通用的细胞。除了因其能够高水平表达抗体外,其生产的抗体的糖基化修饰与人体体内产生的抗体糖基化修饰最为接近。因此,用CHO细胞优化的抗体可以直接采用CHO细胞生产。由别的系统优化的抗体还必须适应CHO细胞中表达和克服因在CHO细胞中糖基化改变而改变结构和活性的差异才能使用CHO细胞生产。